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说明有残余蛋白质存在;比值太高

文章来源:未知 更新时间:2019-11-06 22:18

  (Microbial Identification and Typin)本公司的微生物种属鉴定及分型是通过提取不同样品微生物DNA,再以DNA为模板,用种属专一性引物进行PCR扩增,对PCR扩增产物进行序列分析来确定样品中微生物的种属和株型。本方法免去了烦琐、需时长的培养过程,可检出传统方法不可培养的微生物,并能原位反映微生物群落结构的真实情况,是目前*进的微生物分类方法.本方法原理图(以细菌分型为例)如下:

  (1)灵敏性高:一般可达到0.5~5pg或更低浓度核酸的检测水平,可以检测极少量或拷贝数少的基因组(可延长曝光时间或增敏屏增敏)。

  (2)微生物种属鉴定及分型(Microbial Identification and Typin)特异性高:用放射自显影法,样品中存在的无关核酸或非核酸成分不会干扰检测结果,准确率高,假阳性率低。

  (3)方法简便。所以,放射性同位素标记核酸探针在一些有条件的单位,作为主要的标记方法仍在使用。

  RNA定量方法与DNA定量相似。RNA在260nm波长处有*的吸收峰。365体育因此,可以用260nm波长分光测定RNA浓度,OD值为1相当于大约40μg/ml的单链RNA。如用1cm光径,用ddH2O稀释DNA样品n倍并以ddH2O为空白对照,根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度:

  RNA纯品的OD260/OD280的比值为2.0,故根据OD260/OD280的比值可以估计RNA的纯度。若比值较低,说明有残余蛋白质存在;比值太高,则提示RNA有降解。

  1.样品量和Trizol的加入量一定要按步骤(1)的比例,不能随意增加样品量或减少Trizol量,否则会使内源性RNase的抑制不完全,导致RNA降解。

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